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Intégration transparente de la microscopie optique et Images AFM

Published on April 19, 2011 at 7:20 PM

JPK Instruments , un fabricant leader mondial de l'instrumentation pour la recherche dans nanoanalytic sciences de la vie et de la matière molle, fournit un logiciel unique pour rendre l'affichage des images microscopie optique en collaboration avec des images de microscopie à force atomique, un exercice sans faille. Ce package est appelé DirectOverlay.

La microscopie à force atomique (AFM) est un outil puissant pour étudier une grande variété de différents échantillons avec une résolution nanométrique dans des conditions physiologiques. En plus de fournir des mesures topographiques, des informations sur les forces d'interaction et les propriétés mécaniques, comme l'adhérence et l'élasticité peuvent également être obtenus. La parfaite intégration de l'AFM avec un montage optique peut augmenter la gamme d'applications et ouvre de nombreuses possibilités pour corréler des informations structurales avec des informations optiques tels que l'étiquetage de certains composants fonctionnalisés.

Un exemple de la puissance de DirectOverlay du JPK: une image de fluorescence met en évidence trois molécules individuelles d'ADN marqués alors que les zooms d'image 3D pour une image haute résolution AFM 700nm. (Gracieuseté du Dr M. échantillon Modesti, CNRS Marseille)

Pour réaliser la combinaison parfaite de l'optique et de l'AFM à l'échelle moléculaire, les distorsions doivent être évités. Cela se traduira par deux images, comme des images optiques et AFM, qui ne sont pas parfaitement superposition. Raisons de distorsions comprennent des aberrations résultant de lentilles et de miroirs du système optique. Cette non-linéaire d'étirement, de rotation et la compensation des images optiques sont présents dans presque tous les types de configurations optiques.

Pour générer une superposition parfaite des deux techniques, JPK a développé une méthode de calibrage de pointe, appelée DirectOverlay, qui utilise la précision du système de numérisation AFM en boucle fermée afin de permettre un affichage des angles vraie absolue et coordonne la longueur. La procédure d'étalonnage se fait automatiquement et utilise les positions connues et les décalages du cantilever pour calibrer l'image optique en les coordonnées de l'AFM. Pour générer un match parfait de l'image optique et AFM, 25 points ou plus sont utilisés dans l'algorithme de calibrage. À chaque point, une image optique est acquis et la position de la pointe cantilever est automatiquement détecté dans chaque image optique sans nécessiter d'entrée sur l'angle en porte à faux, la forme ou le grossissement. L'algorithme effectue alors une conversion non linéaire et, par conséquent, l'image optique est corrigé pour toute imperfection optique et convertie en coordonnées linéarisées longueur de l'AFM. Cela donne une parfaite intégration des données optiques et AFM avec une précision sous-limite de diffraction.

Enfin, l'image calibrée optique est transféré dans le logiciel SPM JPK, de sorte que l'AFM régions de balayage peut être sélectionnée au sein de l'optique de l'image. Direct »dans l'image optique« sélection des mesures AFM (imagerie, la spectroscopie de cartographie et de la force) conduit à des expériences plus efficace et réduit considérablement l'image aperçu de numérisation dans l'AFM.

Last Update: 9. October 2011 15:42

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