Université de St Andrews Utilisez NanoSight NTA pour caractériser les exosomes

Published on May 10, 2011 at 6:53 PM

NanoSight , leader mondial des fabricants de rapports nanoparticules technologie unique de caractérisation que l'École de médecine de l'Université de St Andrews est d'utiliser l'analyse des nanoparticules de suivi, le NTA, pour caractériser le comportement exosomes.

Dr Simon Powis et ses collègues de l'Université de St Andrews tentent de comprendre comment un ensemble de molécules impliquées dans la défense du système immunitaire contre les pathogènes intracellulaires fonction. Ces molécules sont appelées complexe majeur d'histocompatibilité (CMH) de classe I molécules, et ils sont exprimés sur presque toutes les cellules dans le corps. Leur pertinence pour la médecine est plus communément connu parce qu'ils sont l'un des principaux ensembles de gènes qui doivent être étroitement appariés quand une transplantation d'organe est faite, sinon la greffe ne peut être rejetée.

Dr Simon Powis avec son NanoSight LM10 système pour étudier le comportement des exosomes

On sait maintenant que leur rôle précis dans le système immunitaire normal est de se lier de petits fragments de protéines virales dégradées dont ils affichage pour les lymphocytes T du système immunitaire. Ceci permet la détection spécifique des «étrangers» des protéines, soit par des agents pathogènes potentiels, et permet au système immunitaire afin de détecter spécifiquement et de tuer les cellules infectées, tout en laissant une cellule voisine non infectés seul. En outre, il ya une maladie auto-immune fascinante étroitement associée à un type particulier de molécules du CMH de classe I. Plus de 90% des patients atteints d'un type d'arthrite inflammatoire appelée spondylarthrite ankylosante qui affecte la colonne vertébrale, exprime un type spécifique de CMH de classe I molécule appelée HLA-B27. Le lien entre cet état arthritique et HLA-B27 a été connu depuis près de 40 ans, mais le mécanisme de la maladie et comment HLA-B27 est impliqué est encore à se faire comprendre.

Alors que le groupe Powis étudiaient molécules CMH de classe I exprimées sur les exosomes, on a découvert qu'ils peuvent exprimer un nouveau type de structure. La région de la queue de la molécule CMH de classe I, qui se trouve à l'intérieur du exosomes, peuvent souvent former une liaison disulfure liaison à une autre molécule de CMH de classe I, apportant ainsi deux molécules étroitement ensemble dans une structure dimérique. Cela ne se produit pas normalement sur les cellules, car le cytoplasme a un milieu réducteur, la prévention des ponts disulfure de se former. Cependant, dans les exosomes la capacité à maintenir un environnement réducteur semble avoir été perdu.

Le groupe est en train d'étudier si les cellules du système immunitaire voir ces CMH de classe I sur les exosomes structures dimères et d'y répondre. Une autre question clé est ce que les peptides sont trouvés liés aux molécules CMH de classe I sur les exosomes. La voie de la production exosomes n'est pas la voie normale pour la classe de molécules du CMH I pour arriver à la surface des cellules, donc la possibilité que différents peptides sont trouvés dans ce sous-ensemble de CMH de classe I exosomales molécules est une possibilité réelle. Pour être en mesure d'étudier ces exosomes d'une variété de cellules du système immunitaire, il est nécessaire de détecter leur présence et la taille dans les cultures. C'est la raison pour laquelle l'équipe de choisir l'approche NanoSight NTA avec le système LM10.

Avant d'utiliser NanoSight, cytométrie de flux a été un outil précieux dans la caractérisation préliminaire des exosomes libérés par les cellules immunitaires. Dr Powis, dit «L'approche NanoSight permet une détermination plus précise de la taille et la concentration relative à la fois avant et après purification. Ceci nous permet de contrôler la libération d'exosomes dans la gamme 30-150nm après activation avec une variété de stimuli immunitaires pertinentes à la fois la normale et aberrant réponses immunitaires d'une manière pas auparavant visible avec la cytométrie de flux. "

Last Update: 4. October 2011 13:12

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