Universitas St Andrews Penggunaan NTA NanoSight untuk Karakterisasi exosomes

Published on May 10, 2011 at 6:53 PM

NanoSight , produsen terkemuka dunia yang unik laporan nanopartikel karakterisasi teknologi yang School of Medicine di University of St Andrews adalah menggunakan nanopartikel analisis pelacakan, NTA, untuk mengkarakterisasi perilaku exosome.

Dr Simon Powis dan rekan-rekannya di University of St Andrews bekerja untuk memahami bagaimana satu set molekul yang terlibat dalam pertahanan sistem kekebalan tubuh terhadap patogen intraseluler fungsi. Molekul-molekul ini disebut kompleks histokompatibilitas utama (MHC) kelas I molekul, dan mereka dinyatakan pada hampir setiap sel dalam tubuh. Relevansi mereka untuk obat yang paling umum dikenal karena mereka adalah salah satu set kunci gen yang harus erat cocok ketika transplantasi organ dibuat, jika transplantasi dapat ditolak.

Dr Simon Powis dengan NanoSight sistemnya LM10 untuk mempelajari perilaku exosome

Sekarang diketahui bahwa peran tepat mereka dalam sistem kekebalan tubuh normal adalah untuk mengikat fragmen kecil dari protein virus yang mereka terdegradasi tampilan ke limfosit T dari sistem kekebalan tubuh. Hal ini memungkinkan deteksi tertentu 'asing' protein, yaitu dari patogen potensial, dan memungkinkan sistem kekebalan tubuh untuk secara khusus mendeteksi dan membunuh sel yang terinfeksi, sementara meninggalkan sel tetangga yang tidak terinfeksi sendiri. Selain itu, ada satu penyakit autoimun menarik erat terkait dengan jenis tertentu molekul MHC kelas I. Lebih dari 90% pasien dengan jenis arthritis inflamasi yang disebut ankylosing spondylitis yang mempengaruhi tulang belakang, mengungkapkan satu jenis tertentu MHC kelas I molekul yang disebut HLA-B27. Hubungan antara kondisi rematik dan HLA-B27 telah dikenal selama hampir 40 tahun, tetapi mekanisme penyakit dan bagaimana HLA-B27 yang terlibat belum dipahami.

Sementara kelompok Powis sedang mempelajari MHC kelas I molekul diekspresikan pada exosomes, ditemukan bahwa mereka dapat mengekspresikan jenis novel struktur. Daerah ekor molekul MHC kelas I, yang duduk di dalam exosome, sering dapat membentuk ikatan disulfida hubungan lain MHC kelas I molekul, sehingga membawa dua molekul erat bersama dalam sebuah struktur dimer. Hal ini biasanya tidak terjadi pada sel karena sitoplasma memiliki lingkungan mengurangi, mencegah ikatan disulfida dari pembentukan. Namun, dalam exosomes kapasitas untuk memelihara lingkungan mengurangi tampaknya telah hilang.

Kelompok ini sekarang mempelajari apakah sel-sel sistem kekebalan tubuh melihat MHC kelas I dimer struktur pada exosomes dan menanggapi mereka. Lain pertanyaan kunci adalah apa peptida ditemukan terikat untuk MHC kelas I molekul pada exosomes. Jalur produksi exosome bukan rute normal untuk MHC kelas I molekul untuk sampai ke permukaan sel, sehingga kemungkinan bahwa peptida yang berbeda ditemukan dalam subset dari MHC kelas I molekul exosomal adalah kemungkinan yang nyata. Untuk dapat mempelajari exosomes dari berbagai sel-sel kekebalan, perlu untuk mendeteksi kehadiran mereka dan ukuran dalam budaya. Ini adalah alasan bagi tim memilih pendekatan NTA NanoSight dengan sistem LM10.

Sebelum menggunakan NanoSight, flow cytometry telah membuktikan alat yang berharga dalam karakterisasi awal dari exosomes dikeluarkan oleh sel kekebalan. Dr Powis mengatakan "Pendekatan NanoSight memungkinkan penentuan yang lebih akurat ukuran dan konsentrasi relatif baik sebelum dan sesudah pemurnian ini memungkinkan kita untuk memantau rilis exosomes dalam kisaran 30-150nm setelah aktivasi dengan berbagai rangsangan kekebalan yang relevan untuk kedua normal. dan respon imun yang menyimpang dengan cara yang sebelumnya tidak terlihat dengan sitometri. "

Last Update: 6. October 2011 05:26

Tell Us What You Think

Do you have a review, update or anything you would like to add to this news story?

Leave your feedback
Submit