Характеризация Размера и Положения Nanoparticle До Изучений Nanotoxicological Используя Анализ Nanoparticle Отслеживая

AZoNano

Покрытые Темы

Введение
Методы и Материалы
     Людская Плазма
     Частицы
Результаты
Обсуждение
Заключения

Введение

Перед начинать любое nanotoxicological изучение, повелительно знать положение nanoparticles используемых, и в частности их размер и распределение по размеру в средствах соотвествующих испытания.

NanoSight развило уникально аппаратуру для характеризовать nanoparticles в жидкостном подвесе. Это примечание обсуждает применение этой аппаратуры в характеризации nanoparticles золота и их компоситов в биологически уместной жидкости. Не Похож На классические методы светлый разбрасывать, метод Отслеживать Nanoparticle и (NTA) Анализа позволяет nanoparticles быть определенным размер в подвесе на основание частиц--частицы, позволяющ более высокому разрешению и поэтому более лучшему вниканию комплексирования чем методы ансамбля (как Динамический Светлый Разбрасывать, DLS). Изучение смотрит изменение в размере nanoparticles золота сравнивая случай стандартного растворителя dispersant (буфера цитрата) к разбавленной плазме (содержа протеины).

Методы и Материалы

Людская Плазма:

Кровь была принята от seemingly здоровых дарителей. Пробки были центрифугованы, на минута 5 на 800 RCF для того чтобы pellet красные и белые клетки крови. Супернатант (плазма) был перенесен к обозначенным пробкам и сохранен на -80°C. По таять плазму был центрифугован снова на минута 3 на kRCF 16,1 более далее для того чтобы уменьшить присутсвие красных и белых клеток крови. Супернатант был перенесен к новому сосуду, заботясь для того чтобы не нарушить лепешку.

Частицы:

Nanoparticles Золотого стандарта NIST 60 nm были использованы (опорный материал 8013 NIST). Эти хранились, были подготовлены и были использованы согласно уместным рапортам исследования. Золото было разбавлено к концентрации приблизительно 108 particles/ml используя стандартный буфер цитрата pH=7.19. Для рассеиваний в плазме, людская плазма была разбавленным 1:1000000 в буфере цитрата, и µl 10 nanoparticles золота было разбавлено с µl 790 разбавленной плазмы.

Отслеживать и Анализ Nanoparticle были унесены на NanoSight LM10. Все подготовка и измерения образца были унесены на Университете Дублине, Ирландии и анализ был выполнен NanoSight используя бета версию ПО NTA 2,0. Были записаны, что и были проанализированы в режиме серии обеспечили Множественные видео, каждое 166s длиной, статистически инвариантность. Дано что плазма естественное ионное средство, замечено что вопрос комплексирования протеина всегда будет проблемн.

Диаграмма 1. Аппаратура NanoSight LM10.

Диаграмма 2. Видеоизображение 60 частиц Золота nm как захвачено аппаратурой NanoSight LM10.

Результаты

Видео nanoparticles были записаны (Диаграмма 2), отслеживаемая и анализируемая для размера разбавляно в буфере цитрата и в людской плазме, и исправлено для длины следа (Диаграммы 3). Измерение образца также было сделано DLS (Диаграмма 4) и все результаты суммированы в Таблице 1.

Диаграмма 3. результаты NanoSight используя NTA.

Диаграмма 4. Измерение такого же образца DLS.

Обсуждение

Методы для измерения золота разбавленного в цитрате были по мере того как те детализированные в опорных материалах сообщают. Сводку результатов как измерено NIST можно увидеть в Таблице 2.

NTA можно использовать для того чтобы определить и визуально и измерением концентрации что частицы все еще monodispersed добавляя доказательство к предположению что протеины в поступке подвеса для того чтобы покрыть nanoparticles (Диаграмму 5) (и что увеличение в размере не должно к комплексированию). Не возможно выпытать эту информацию чисто от измерения DLS, которое основанный ансамбль.

Диаграмма 5. доказательство NTA поддерживает предположение что действуют, что покрывают протеины в подвесе nanoparticles.

Сводка Таблицы 1. результатов методами NTA и DLS.

Метод

Материал

Параметр

Значение (nm)

Ошибка (nm)

NTA

Золото 60 nm

Середина

61,22

0,93

Режим

60,08

1,01

Стандартно
отступление

6,57

0,92

NTA

Золото 60 nm (плазма)

Середина

70,4

1,8

Режим

68,5

1,67

Стандартно
отступление

9,3

0,83

DLS

Золото 60 nm

Режим

58,5

-

DLS

Золото 60 nm (плазма)

Режим

70,7

-

Сводка Таблицы 2. результатов как измерено NIST.

Метод

Форма Analyte

Nominal 60 nm

AFM

Сух, депозировано на субстрате

55.4±0.3

SEM

Сух, депозировано на субстрате

54.9±0.4

TEM

Сух, депозировано на субстрате

56.0±0.5

ES-DMA

Высушите, аэрозоль

56.3±1.5

DLS (173°)

Разбавленный жидкостный подвес

56.6±1.4

DLS (90°)

Разбавленный жидкостный подвес

55.3±8.3

SAXS

Родной жидкостный подвес

53.2±5.3

Изменение в размере записанном в Диаграммах 2 и 3 показывает увеличение в размере nanoparticle приблизительно 10 nm, соответствие к 5 слоям протеина nm толщиной адсорбированным покрывая nanoparticle.

Заключения

Значительно и измеряемое изменение в распределении по размеру частицы nanoparticles золота monodisperse в присутствии к биологическому средству как людская плазма. Соответствующая методология для измерения толщины слоя плазмы используя 2 независимых метода, NTA и DLS, была использована для того чтобы утвердить один другое.

Ширина и середина распределений измеренных как DLS, так и NTA подобны к ширинаопределенная NIST. В присутствии к плазме, и размер частицы и распределение по размеру частицы увеличивают немножко. NTA предлагает способность измерить абсолютную концентрацию которая может быть использована также для того чтобы дать концентрацию номера nanoparticles золота NIST. NTA также идеально для определять и подсчитывать компоситы nanoparticle как димеры должные к своей способности визуализировать nanoparticles индивидуально. Оно таким образом представляет (для nanoparticles и режимов концентрации используемых здесь) полезный инструмент в блоке методов доступных для bionanoscience и bionanointeractions на проектированных nanomaterials в биологии.

Эта информация найденный, расмотрена и приспособлена от материалов обеспеченных NanoSight.

Для больше информации пожалуйста посетите NanoSight.

Date Added: Dec 22, 2009 | Updated: Mar 7, 2013

Last Update: 7. March 2013 10:44

Ask A Question

Do you have a question you'd like to ask regarding this article?

Leave your feedback
Submit