Los Tubos de Ensayo de Nanodrop Permiten que los Investigadores Estudien las Proteínas Individuales

Published on April 16, 2008 at 11:01 AM

Los Investigadores en el National Institute of Standards and Technology (NIST) han demostrado un nuevo dispositivo que crea el nanodroplet “tubos de ensayo” para estudiar las proteínas individuales bajo condiciones que imiten los límites apretados de una célula viva. “Lindando las proteínas individuales en nanodroplets del agua, los investigadores pueden observar directamente la dinámica y los cambios estructurales de estas biomoléculas,” dice al físico Lorri Goldner, co-autor del papel publicado en Langmuir.

Los Investigadores han demostrado un nuevo dispositivo que crea los tubos de ensayo del nanodroplet para estudiar las proteínas individuales bajo condiciones que imiten los límites apretados de una célula viva.

Los Investigadores han girado recientemente su atención al papel que la apretadura desempeña en el comportamiento de proteínas y otras biomoléculas-allí no son mucho espacio extra en una célula. Los nanodroplets del NIST pueden imitar el ambiente apretado en las células donde viven las proteínas mientras que proporcionan a ventajas sobre otras técnicas para lindar o para inmovilizar las proteínas para el estudio con el cual puede interferir o dañar la proteína. Esta configuración más realista puede ayudar a investigadores a estudiar la base molecular de la enfermedad y a suministrar la información para desarrollar los nuevos productos farmacéuticos. Por ejemplo, las proteínas misfolded desempeñan un papel en muchas enfermedades incluyendo Tipo - 2 diabetes, las enfermedades de Alzheimer y de Parkinson. Viendo cómo las proteínas plegable en estos nanodroplets, los investigadores pueden ganar nuevo discernimiento en estas dolencias y pueden encontrar nuevas terapias.

El sistema de envío del nanodroplet del NIST utiliza las micropipetas de cristal minúsculas para crear las gotitas de agua minúsculas suspendidas en un líquido aceitoso para el estudio bajo un microscopio. Una presión aplicada fuerza la solución del agua que contiene temas de prueba de la proteína a la punta de la micropipeta mientras que se sienta sumergido en una pequeña caída del aceite en el escenario de microscopio. Entonces, como un mago que enrolla un mantel de un vector mientras que deja el servicio de mesa detrás, un interruptor electrónico hace la pipeta mover de un tirón detrás, dejando detrás de una pequeña gotita típicamente menos que un micrómetro en diámetro.

La gotita se lleva a cabo en el lugar con un laser “pinzas ópticas,” y otro laser se utiliza para excitar fluorescencia de la molécula o de las moléculas en la gotita. En un conjunto de experimentos de la fluorescencia, explica Goldner, “Las moléculas parecen imperturbadas por su arresto - no adhieren a las paredes ni salen del contenedor - los hechos importantes a saber para hacer nanochemistry o la biofísica de la único-molécula.” Similar a un trabajo previo (véase los “Micro-Rectángulos del `' de Agua Usados Para Estudiar las Únicas Moléculas”, Tecnología Batido 20 de julio de 2006), investigadores también demostró que las únicas moléculas de proteína fluorescentes se podrían detectar dentro de las gotitas.

La Fluorescencia puede revelar el número de moléculas dentro del nanodroplet y puede mostrar el movimiento o los cambios estructurales de la molécula lindada o las moléculas, permitiendo que los investigadores estudien cómo obran recíprocamente dos o más proteínas. Usando solamente algunas moléculas y cantidades minúsculas de reactivos, la técnica también disminuye la necesidad de substancias químicas costosas o tóxicas.

Last Update: 17. January 2012 08:46

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