Université d'Utilisation Nanosight NTA de Saint Andrews De Caractériser Exosomes

NanoSight, monde-principaux constructeurs de seule technologie de caractérisation de nanoparticle signale que l'École de Médecine à l'Université de Saint Andrews emploie l'analyse de cheminement de nanoparticle, NTA, pour caractériser le comportement exosome.

M. Simon Powis et ses collègues à l'Université de Saint Andrews travaillent pour comprendre comment un ensemble de molécules concernées dans la défense du système immunitaire contre des pathogènes intracellulaires fonctionnent. Ces molécules sont les molécules complexes de la classe I (MHC) d'histocompatibilité principale appelée, et elles sont exprimées sur presque chaque cellule en fuselage. Leur pertinence avec le médicament le plus généralement est connue parce qu'elles sont l'un des ensembles principaux de gènes qui doivent être attentivement appariés quand une greffe d'organe est effectuée, autrement la greffe peut être rejetée.

M. Simon Powis avec son système de NanoSight LM10 pour étudier le comportement exosome

On le sait maintenant que leur rôle précis dans le système immunitaire normal est de gripper de petits éclats des protéines virales dégradées qu'elles affichent aux lymphocytes de T du système immunitaire. Ceci permet le dépistage particulier des protéines « étrangères », c.-à-d. des agents pathogènes potentiels, et permet au système immunitaire particulièrement de trouver et détruire les cellules infectées, tout en laissant une cellule non infectée voisine seule. De plus, il y a une maladie auto-immune fascinante attentivement associée avec un type particulier de molécule de la classe I de MHC. Plus De 90% de patients présentant un type de spondylarthrite ankylosante appelée d'arthrite inflammatoire qui affecte la colonne vertébrale, exprime un type particulier de molécule HLA-B27 appelé de la classe I de MHC. La barrette entre ces condition et HLA-B27 arthritiques a été connue pendant presque 40 années, mais le mécanisme des maladies et comment HLA-B27 est impliqué doit être compris encore.

Tandis Que le groupe de Powis étudiaient des molécules de la classe I de MHC exprimées sur des exosomes, on l'a découvert qu'elles peuvent exprimer un type nouveau de structure. La région d'arrière de la molécule de la classe I de MHC, qui se repose à l'intérieur de l'exosome, peut fréquemment former une liaison de bisulfure-obligation à une autre molécule de la classe I de MHC, de ce fait portant deux molécules attentivement ensemble dans une structure dimère. Ceci normalement ne se produit pas sur des cellules parce que le cytoplasme a un environnement réducteur, empêchant des liaisons disulfide de former. Cependant, dans les exosomes la capacité de mettre à jour un environnement réducteur semble avoir été détruite.

Le groupe étudie maintenant si les cellules du système immunitaire voient ces structures de dimères de la classe I de MHC sur des exosomes et répondent à eux. Est une Autre question clé ce que des peptides sont trouvés attaché aux molécules de la classe I de MHC sur des exosomes. La voie exosome de production n'est pas l'artère normale pour que les molécules de la classe I de MHC obtiennent sur la surface de cellules, ainsi la possibilité que différents peptides sont trouvés dans ce sous-ensemble de classe exosomal de MHC que des molécules d'I est une possibilité réelle. Pour pouvoir étudier ces exosomes d'un grand choix de cellules immunitaires, il est nécessaire de trouver leur présence et taille dans les cultures. C'est la raison de l'équipe choisissant l'élan de NanoSight NTA avec le système LM10.

Avant d'utiliser NanoSight, la cytométrie de flux a eu prouvé un outil de valeur dans la caractérisation préliminaire des exosomes relâchés par des cellules immunitaires. M. Powis dit que « L'élan de NanoSight permet une détermination plus précise de taille et de concentration les deux de parent avant et après la purification. Ceci nous permet de surveiller la release des exosomes dans le domaine 30-150nm après lancement avec un grand choix de stimulus immunisés concernant des réactions immunitaires normales et anormales d'une voie pas précédemment visible avec la cytométrie de flux. »

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